Economy DNA marker 100–500

Odhad velikostí fragmentů DNA generovaných v PCR (PCR fragmentů) nebo štěpením DNA pomocí restrikčních enzymů (restrikčních fragmentů) je obvykle založen na srovnání velikosti těchto fragmentů s fragmenty DNA o známé velikosti (DNA markerů). Velikost PCR fragmentů je nejčastěji v rozmezí 100 - 500 párů bazí. Tuto oblast pokrývají fragmenty DNA, které jsou součástí Economy DNA markeru (viz obr. 1). Tyto fragmenty vznikly amplifikací plasmidové DNA různé délky.

Kat. č. Název Balení Cena
D071 Economy DNA marker 100–500 250 µl/100 vzorků 450,00 Kč
D072 Economy DNA marker 100–500 5x 250 µl/500 vzorků 1 800,00 Kč
D073 Economy DNA marker 100–500 10x 250 µl/1000 vzorků 2 890,00 Kč

Popis produktu

Odhad velikostí fragmentů DNA generovaných v PCR (PCR fragmentů) nebo štěpením DNA pomocí restrikčních enzymů (restrikčních fragmentů) je obvykle založen na srovnání velikosti těchto fragmentů s fragmenty DNA o známé velikosti (DNA markerů). Velikost PCR fragmentů je nejčastěji v rozmezí 100 - 500 párů bazí. Tuto oblast pokrývají fragmenty DNA, které jsou součástí Economy DNA markeru (viz obr. 1). Tyto fragmenty vznikly amplifikací plasmidové DNA různé délky.

Technické údaje

Koncentrace

  • 15 µg DNA/ml pufru (10 mM Tris-HCl, 25 mM EDTA, aditiva).

Kontrola kvality

  • Přítomnost odpovídajících fragmentů je kontrolována elektroforézou v agarózovém gelu v přítomnosti ethidium bromidu (1 µg/ml). Při vizualizaci v UV světle je patrno 5 fragmentů DNA (100, 200, 300, 400 a 500 pb; viz Obr. 1).

Balení

  • 1 zkumavka obsahující 3,75 µg DNA fragmentů ve 250 µl pufru. Jedno balení umožní přípravu až 100 markerů (2,5 µl markeru/vzorek). 

Skladování

  • Skladovat při teplotě -20°C ± 5°C. Materiál snáší opakované rozmrazování.

Doporučený protokol pro určování velikosti PCR produktů

Do 0,5 ml zkumavky vpravit:

  • 2,5 µl DNA marker (kat. č. D071)
  • 7,5 µl PCR H2O (kat. č. P042)
  • 3 µl PCR vkládací pufr Red load (kat. č. P066)

Vzorek promíchat špičkou a nanášet do jamek v gelu připraveném z PCR agarózy (kat. č. P045).

Do vedlejších jamek nanášet vzorky připravené smícháním: 10 µl produkt PCR + 3 µl PCR vkládací pufr.

 

 marker100_500

Obr. 1. Elektroforetická separace Economy DNA markeru 100-500. Economy DNA marker 2,5 µl (1) nebo 5 µl (2) byl doplněn vodou na objem 10 µl a smíchán s 3 µl PCR vkládacího pufru. Fragmenty byly separovány v 1,5% agarózovém gelu, který obsahoval ethidium bromid (1 µg/ml) a 1x TBE pufr. Velikost DNA fragmentů vyjádřená počtem párů bazí je uvedena vlevo.