Zajišťujeme pečlivou výstupní kontrolu každé šarže nezávislou na výrobě. Produkty jsou vybaveny certifikáty kvality, které jsou dostupné v elektronické formě. Všechny výrobky...
Jsme držitel certifikátu ISO 9001:2015 Výroba vysoce kvalitních činidel...
Materiály na testování RNA coronaviru, způsobující COVID-19
PCR START 2x Master Mix kit
PCR START 2x Plain Master Mix kit
qPCR START 2x Master Mix kit
Hot Start DNA polymerázy jsou enzymy, které mají reverzibilně blokovanou enzymatickou aktivitu. V prvním cyklu PCR dochází k odblokování této aktivity. Tím je zajištěno, že při přípravě PCR směsí nedojde k amplifikaci úseků s primery nespecificky vázanými na DNA. Při Hot Start PCR enzym získá aktivitu až při vyšší teplotě při které je nespecifické nasedání primerů zanedbatelné. Pro efektivní Hot Start PCR se často využívají monoklonální protilátky, které se vážou do katalytického místa enzymu. Při prvním denaturačním cyklu PCR (94oC) dojde k ireverzibilní teplotní denaturaci protilátky a tím k odblokování enzymatické aktivity. V produktech Top-Bio provenience je využívána monoklonální protilátka anti-Taq, která je vhodná pro hot-start PCR (Nucleic Acids Res., 36: e93, 2008). Obdobnou funkci jako protilátky mohou mít DNA aptamery, které jsou izolovány z oligonukleotidových knihoven. V rámci spolupráce mezi Top-Bio a Ústavem molekulární genetiky AVČR byl získán aptamer anti-Taq, který je nově využíván pro hot start PCR.
Ve srovnání s protilátkou má DNA aptamer anti-Taq několik výhod při použití pro Hot Start PCR:
(1) nedochází u něj k ireverzibilní denaturaci při teplotách až do 100oC,
(2) jedná se o nízkomolekulární látku, která je připravována synteticky a má známé a definované složení,
(3) není kontaminován komponentami savčích buněk,
(4) je odolný k působení proteáz,
(5) umožňují přípravu PCR směsí při pokojové teplotě,
(6) je cenově dostupnější.