Zajišťujeme pečlivou výstupní kontrolu každé šarže nezávislou na výrobě. Produkty jsou vybaveny certifikáty kvality, které jsou dostupné v elektronické formě. Všechny výrobky...
Jsme držitel certifikátu ISO 9001:2015 Výroba vysoce kvalitních činidel...
Combi PPP Master Mix obsahuje Taq DNA polymerázu a další komponenty nezbytné pro úspěšný průběh PCR reakce ve dvojnásobné koncentraci. Stačí tedy pouze doplnit primery, templátovou DNA a vodu a vzorek je připraven k PCR. Další obsažená aditiva a barvivo umožňují posléze okamžité nanesení vzorku na gel bez nutnosti přidávat vkládací pufr.
Oproti PPP Master Mixu (kat. č. P124-P126) navíc obsahuje protilátku, která blokuje aktivitu DNA polymerázy. Protilátka se degraduje až při prvním denaturačním kroku PCR. Tato tzv. hot start PCR je zvláště vhodná všude tam, kde dochází k nežádoucí amplifikaci nespecifických fragmentů DNA, k nízké amplifikaci DNA fragmentů, popřípadě k tvorbě artefaktů vznikajících amplifikací kombinovaných primerů.
Kit obsahuje monoklonální protilátku, která se váže na Taq DNA polymerázu, tím blokuje její enzymatickou aktivitu a zamezuje amplifikaci nespecifických DNA fragmentů. Protilátka je teplotně inaktivována při prvním denaturačním cyklu PCR.
Kit obsahuje 2x koncentrované komponenty nezbytné pro průběh PCR reakce. To umožňuje rychlou přípravu reakční směsi bez nutnosti rozmrazování jednotlivých komponent. Stačí dodat primery, templátovou DNA a doplnit H2O (součást balení).
K amplifikovaným vzorkům není potřeba přidávat vkládací pufr. Kit obsahuje barvivo a aditiva, která umožňují nanesení vzorku na gel a elektroforézu ihned po ukončení PCR reakce.
Barvivo migruje v čele gelu a neinterferuje tak s kvantifikovatelností PCR produktů. Barvivo ani aditiva nemají vliv na průběh amplifikace.
Kit umožňuje velmi citlivou a specifickou amplifikaci požadovaných PCR fragmentů z genomické DNA nebo z komplementární cDNA získané metodou reverzní transkripce; obsahuje MgCl2 v koncentraci vhodné pro většinu PCR reakcí.
Přidaná monoklonální protilátka výrazně snižuje tvorbu nespecifických produktů.
Obr. Monoklonální protilátky anti-Taq přítomná v Combi PPP Master Mixu výrazně snižuje amplifikaci nespecifických produktů.
Z myších buněk obsahující dvě (+/+), jednu (+/-) nebo žádnou (-/-) alelu studovaného genu byla izolována mRNA (pomocí RNA Blue), převedena na cDNA (pomocí M-MLV reverzní transkriptázy) a přítomnost studované cDNA (950 bp) byla ověřena pomocí PCR s použitím Combi PPP Master mixu nebo s použitím PPP Master Mixu s kontrolní protilátkou.
1 zkumavka s 0,5 ml Combi PPP Master Mixu (na 40 reakcí v celkovém objemu 25 µl).
1 zkumavka s 1,5 ml PCR H2O.
Combi PPP Master Mix se dodává 2x koncentrovaný: 150 mM Tris-HCl, pH 8,8 (25oC), 40 mM (NH4)2SO4, 0,02% Tween 20, 5 mM MgCl2, 400 µM dATP, 400 µM dCTP, 400 µM dGTP, 400 µM dTTP, 100 U/ml Taq DNA polymerázy, monoklonální protilátka anti-Taq (38 nM), barvivo, stabilizátory a aditiva.
Skladovat při teplotě -20°C ± 5°C. Materiál snáší opakované rozmrazování.
Čistota Taq DNA polymerázy je ověřena metodou SDS PAGE, kdy enzym migruje jako jediný proužek o molekulové hmotnosti 94 kD. Preparát neobsahuje nukleázy.
Každá šarže Combi PPP Master Mixu je testována na amplifikaci genu o jedné kopii v genomové DNA.
Kat. č. | Název | Balení | Cena |
---|