PCR vkládací pufr

Vkládací „loading“ pufry jsou roztoky o vysoké hustotě, které usnadňují vkládaní vzorků do jamek v gelu. PCR vkládací pufr obsahuje barvivo, bromofenolovou modř a xylen cyanol, které usnadňují monitorování průběhu elektroforézy DNA fragmentů. Na 10 µl PCR produktu se přidávají 2-3 µl vkládacího pufru.

Skladovat při při teplotě 4^oC ± 3^oC.

1,5 ml ve šroubovacích umělohmotných lahvičkách.

Každá šarže PCR vkládacího pufru je testována na použití pro nanášení DNA fragmentů při elektroforéze v PCR agaróze.

Obr. Vkládací pufry
DNA marker 155-970 byl smíchán s PCR vkládacím pufrem (1,6), vkládacím pufrem bez barvené značky (2), Yellow load (3), Red load (4) a vkládacím pufrem Edge (5). DNA fragmenty byly separovány v 1% agarózovém gelu v 0,5% TBE pufru.
(A) Gel byl obarven ethidium bromidem (0,1µg/ml) a fotografován v UV světle.
(B) gel byl fotografován ve viditelném světle. Z obrázku je patrné, že přes odlišnou pohyblivost v agarózovém gelu barviva neovlivňují pohyblivost DNA fragmentů.

Viz. také: