PPP Master Mix bez MgCl2

Jedná se o doplňkový produkt z řady PPP Master Mixů. Oproti klasickému PPP Master Mixu (kat. č. P124-P126) není MgCl2 přidán přímo do Master Mixu, ale je dodáván odděleně. Pokud je požadovaný produkt PCR reakce obtížně amplifikovatelný, je možné optimalizovat koncentraci MgCl2 pro získání co nejlepších podmínek pro průběh PCR.

Kat. č. Název Balení Cena
P134 PPP Master Mix bez MgCl2 40 reakcí, 0,5 ml 440,00 Kč
P135 PPP Master Mix bez MgCl2 200 reakcí, 5x 0,5 ml 1 745,00 Kč
P136 PPP Master Mix bez MgCl2 1000 reakcí, 25x 0,5 ml 6 980,00 Kč
P136xl PPP Master Mix bez MgCl2 4x 1000 reakcí, 100x 0,5 ml 20 940,00 Kč

Popis produktu

Jedná se o doplňkový produkt z řady PPP Master Mixů. Oproti klasickému PPP Master Mixu (kat. č. P124-P126) není MgCl2 přidán přímo do Master Mixu, ale je dodáván odděleně. Pokud je požadovaný produkt PCR reakce obtížně amplifikovatelný, je možné optimalizovat koncentraci MgCl2 pro získání co nejlepších podmínek pro průběh PCR.

Protože tento produkt již obsahuje Taq DNA polymerázu a optimalizovaný reakční pufr ve dvojnásobné koncentraci, stačí pouze doplnit MgCl2 na požadovanou koncentraci, dodat primery, DNA templát a vodu a zahájit PCR reakci. Další obsažená aditiva a barvivo umožňují posléze okamžité nanesení vzorku na gel bez nutnosti přidávat vkládací pufr.

Rychlá příprava (2x koncentrovaný)

  • Kit obsahuje 2x koncentrované komponenty nezbytné pro průběh PCR reakce. To umožňuje rychlou přípravu reakční směsi bez nutnosti rozmrazování jednotlivých komponent. Stačí dodat primery, templátovou DNA, doplnit MgCl2 na požadovanou koncentraci a H2O (oboje je dodáváno jako součást balení).
  • Umožňuje snadné určení optimální koncentrace MgCl2 pro ideální průběh PCR.

Okamžité nanášení na gel

  • K amplifikovaným vzorkům není potřeba přidávat vkládací pufr. Kit obsahuje barvivo a aditiva, která umožňují nanesení vzorku na gel a elektroforézu ihned po ukončení PCR reakce.
  • Barvivo migruje v čele gelu a neinterferuje tak s kvantifikovatelností PCR produktů. Barvivo ani aditiva nemají vliv na průběh amplifikace.

Optimalizovaný reakční pufr

  • Obsahuje reakční pufr, který zvyšuje účinnost i specificitu PCR.
  • Obsahuje stabilizátory, které umožňují krátkodobé skladování při 4°C.

Technické údaje

Komponenty základního balení

  • 1 zkumavka s 0,5 ml PPP Master mixu bez MgCl2 (na 40 reakcí v celkovém objemu 25µl).
  • 1 zkumavka s 0,5 ml 25 mM MgCl2.
  • 1 zkumavka s 1,5 ml PCR H2O.

Složení

  • PPP Master Mix bez MgCl2 se dodává 2x koncentrovaný: 150 mM Tris-HCl, pH 8,8 (při 25°C), 40 mM (NH4)2SO4, 0,02% Tween 20, 400 µM dATP, 400 µM dCTP, 400 µM dGTP, 400 µM dTTP, 100 U/ml Taq DNA polymerázy, barvivo, stabilizátory a aditiva.

Skladování 

  • Krátkodobě (dny) skladovat při teplotě 4°C ± 3°C.
  • Dlouhodobě skladovat při teplotě -20°C ± 5°C. Materiál snáší opakované rozmrazování.

Kontrola kvality 

  • Čistota Taq DNA polymerázy je ověřena metodou SDS PAGE, kdy enzym migruje jako jediný proužek o molekulové hmotnosti 94 kD. Preparát neobsahuje nukleázy.
  • Každá šarže PPP Master Mixu bez MgCl2 je testována na amplifikaci genu o jedné kopii v genomové DNA.